貨號(hào):10420-1, 包裝:100ML,價(jià)格:280元
英文名稱:RNAstore Reagent

RNAstore樣本保存液
RNAstore Reagent
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
RNAstore是一種液態(tài)的,無(wú)毒的組織保存試劑,它能迅速滲入組織細(xì)胞中,通過(guò)抑制RNase活性從而保護(hù)非冷凍細(xì)胞RNA于原位,使其更適合于組織基因表達(dá)譜的分析,獲得組織塊后,迅速浸泡在RNAstore中保存,而不會(huì)引起RNA的降解,這樣可以不必馬上處理樣本,也不必將樣本冷凍在液氮中,RNAstore可廣泛應(yīng)用于多種脊椎動(dòng)物樣本,包括腦,心,腎,脾,肝,肺和胸腺。
推薦不同組織樣品的RNAstore使用量:
大鼠的不同組織 | 組織重量(mg) | RNAstore的使用量(ml) |
腎 | 100-500 | 1-5 |
脾 | 100-300 | 1-3 |
肺 | 100-300 | 1-3 |
心 | 100-170 | 1-1.7 |
肝 | 100-1000 | 1-10 |
新鮮非冷凍組織按1:10比例浸入RNAstore后,常溫1周--37℃1天,4℃至少保存1個(gè)月,組織4℃浸泡過(guò)夜后-20℃或-80℃長(zhǎng)期保存,RNAstore保存的組織可以反復(fù)凍融至少20次。
注意事項(xiàng):請(qǐng)務(wù)必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項(xiàng)
1--RNAstore只能用于新鮮組織,在浸入RNAstore之前不能冷凍組織。
2--要求組織樣本任何一邊的最大厚度不能大于0.5cm,然后將組織塊放入到10倍體積的RNAstore中保存。如果組織樣品厚度過(guò)大,RNAstore滲入組織樣本中速度將會(huì)減慢造成RNA降解,所以如果厚度超過(guò)0.5cm需簡(jiǎn)單切碎組織后再在RNAstore中貯存。
3--該試劑不適合于保存植物葉片,其表面的蠟表皮使RNAstore很難完全滲入組織中。
4--對(duì)于組織培養(yǎng)細(xì)胞的操作,先沉淀細(xì)胞,用PBS洗一次,再用少量的PBS懸浮細(xì)胞,然后加入2倍體積的RNAstore保存,后續(xù)RNA的提取可以采用直接離心去除RNAstore后進(jìn)行RNA提取,也可以不用去除RNAstore直接加入RNA提取裂解液進(jìn)行直接提取。
離心法:因?yàn)?/span>RNAstore的介質(zhì)濃度比典型的細(xì)胞培養(yǎng)介質(zhì)濃度高,因此用通常沉淀活細(xì)胞的離心力無(wú)法沉淀RNAstore中的細(xì)胞,離心沉淀細(xì)胞,去除RNAstore,至少需要5000×g的以上的離心力。
直接提取法:通過(guò)向細(xì)胞混合物中加入10倍體積的RNA提取試劑來(lái)完成。
5--對(duì)于細(xì)菌操作,先離心收集細(xì)菌,用PBS洗一次,再用少量的PBS懸浮細(xì)胞,加入2倍體積的RNAstore保存,后續(xù)RNA的提取參照組織細(xì)胞的提取步驟,大腸桿菌保存在RNAstore中4℃條件下1個(gè)月仍很完整,產(chǎn)生的不降解的RNA.
6--對(duì)于全血中的白細(xì)胞保存,需將白細(xì)胞從紅細(xì)胞和血清中分離出來(lái),并按組織培養(yǎng)細(xì)胞一樣處理后,白細(xì)胞便能有效地保存在RNAstore中,不要將全血,血漿或血清中的RNA保存在RNAstore中,因?yàn)樗鼈兊牡鞍缀扛?,與RNAstore混合后易形成不溶的沉淀。
操作步驟:
1--切割組織前估計(jì)加入RNAstore中的組織重量,并根據(jù)加入至少10倍體積組織的量確定RNAstore的使用量(譬如:組織100mg,需加入1mlRNAstore)
2--切割組織后放入RNAstore中,如果組織樣本過(guò)大需剪切橙任何一邊的最大厚度不能大于0.5cm。
注意:為了安全有效的保護(hù)組織樣本,該組織樣本應(yīng)完全浸沒(méi)入RNAstore中,并且組織樣本的任何一邊的最大厚度不應(yīng)超過(guò)0.5cm。
3--貯存于RNAstore中的樣品組織4℃可至少保存1個(gè)月,室溫1周,37℃1天。對(duì)于-20℃或-80℃長(zhǎng)期保存,先將樣本在4℃條件下過(guò)夜?jié)B透,然后將組織從RNAstore中取出后放入-20℃或-80℃長(zhǎng)期保存,樣本可隨后在室溫下解凍及再凍存,其RNA的質(zhì)和量都不會(huì)受影響。
注意:建議組織樣品在RNAstore中低溫保存(4℃可至少保存1個(gè)月,-20℃或-80℃長(zhǎng)期保存),不建議37℃或室溫保存,凍存于-20℃或-80℃的組織可反復(fù)凍融至少20次不影響RNA提取,保存于RNAstore中的組織如果需要長(zhǎng)途運(yùn)輸,運(yùn)輸過(guò)程中需要確保組織完全浸入RNAstore中。
4--從RNAstore中取出樣品就可以用RNA提取試劑盒,直接提取RNA.
保存溫度:
RT(如溶液產(chǎn)生沉淀或晶體析出,用之前需37℃完全溶解沉淀,不影響效果)

