貨號：10135-1， 包裝：100ML(500次），價格：300元
貨號：10135-2， 包裝：500ML(2500次)，價格：980元
英文名稱：Rapid BCA protein quantitative Kit
快速BCA 蛋白定量試劑盒
產(chǎn)品簡介：
BCA蛋白定量法是利用蛋白質(zhì)可將 Cu2+還原成 Cu+，而生成的Cu+可與BCA形成紫色絡(luò)合物的原理來定量檢測蛋白含量。該方法快速、穩(wěn)定、選擇性好，不受蛋白種類影響、且在一定濃度范圍內(nèi)受表面活性劑影響小，成為目前應(yīng)用最廣泛的蛋白定量方法之一，可實現(xiàn)對蛋白質(zhì)進行快速、穩(wěn)定、靈敏的濃度測定。本試劑盒標準品采用高質(zhì)量BSA且可以4℃保存，使實驗更精準便捷。
使用方法
1. 按下表在酶標板中做蛋白標準品稀釋。稀釋時，先向每孔加入對應(yīng)體積二次水，再按照蛋白濃度由低到高的順序依次加入蛋白標準品溶液，混勻。標準孔稀釋好后，再根據(jù)需要向空孔中加入原樣或稀釋后的樣品溶液，每孔20μL。建議標準孔和樣品孔均做3次平行對照。
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | |
二次水 (μL) | 20 | 19.5 | 19 | 18 | 16 | 12 | 8 | 4 | 0 |
蛋白標準品 (μL) | 0 | 0.5 | 1 | 2 | 4 | 8 | 12 | 16 | 20 |
蛋白含量 (μg) | 0 | 0.5 | 1.0 | 2.0 | 4.0 | 8.0 | 12.0 | 16.0 | 20.0 |
2. 工作液按照BCA試劑 A和BCA試劑 B以50:1的比例混合，每孔加200 μL，混勻。所需工作液總體積 μL =200 μL×總孔數(shù)×1.1。1.1系數(shù)可自行調(diào)整，保證每孔有足量工作液加入即可。
3. 將酶標板放入水浴鍋中（不可將酶標板浸于水中），37℃ 孵育10 min或目測更合適時間，如樣本蛋白濃度過低也可60℃孵育，孵育時如酶標板蓋板冷凝水較多時，可用吸水紙擦去。孵育結(jié)束后，用酶標儀或nano drop測定每孔562 nm處的吸光值。
4. 以每孔蛋白含量為橫坐標，標準品每孔吸光度減去空白孔吸光度為縱坐標，繪制標準曲線，并計算樣品孔蛋白含量。計算樣品孔蛋白含量時，所用吸光度值應(yīng)扣去空白孔數(shù)值。樣品蛋白濃度μg/μL= 標準曲線計算出的樣品孔蛋白含量μg÷20 μL，如測定樣品經(jīng)過額外稀釋，在計算原樣時還應(yīng)還應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。
注意事項：
1. 蛋白標準品原液為1 μg/μL，方便自行設(shè)計蛋白標準孔含量梯度。標準孔加入的蛋白標準品原液體積數(shù) (μL) 即為該孔的蛋白絕對含量值 (μg)，再用二次水補足體積至20 μL即可。
2. 本試劑盒每孔最小檢測蛋白量為0.5 μg。
3. 確保樣品中SDS、Triton X-100、Tween等表面活性劑含量低于5%，EDTA低于10 mM，無EGTA，DTT、β-巰基乙醇低于1 mM。
貯存條件
BCA試劑 A與BCA試劑 B室溫保存，蛋白標準品4℃保存。
包裝規(guī)格
| BCA試劑盒 | A液 | B液 | 1 μg/μL蛋白標準品 |
| 50ML | 50ml | 1ml | 5ml |
| 100ML | 100ml | 2ml | 10ml |
| 500ML | 500ml | 10ml | 50ml |